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胎牛血清沉淀了怎么辦?

更新時間:2023-09-26  |  點擊率:438

一(yi)般情況下,血清(qing)(qing)沉淀不會影(ying)響細胞(bao)培養效果(guo),但是出于一(yi)致(zhi)性等方面的(de)考慮,還應盡可(ke)能減(jian)少在使用或運輸過程中,人為因素導致(zhi)的(de)血清(qing)(qing)沉淀。

1、正確的運(yun)輸溫度:運(yun)輸過(guo)程中(zhong),要嚴格-20℃低溫,避(bi)免反復凍融。

2、使用正(zheng)確的融化方(fang)法(fa):在(zai)使用時(shi),正(zheng)確的解(jie)凍方(fang)法(fa)也很重要,這里推薦使用國際上(shang)通用的“三(san)步(bu)法(fa)"解(jie)凍。

操作

溫度

100ml

500ml

1000ml

第(di)1步

室溫

35 min

90 min

100 min

或(huo)15-20℃水(shui)浴

5 min

18 min

20 min

第2步

20℃水浴

15 min

25 min

30 min

第(di)3步

37℃水浴(yu)

20 min

35 min

45 min


需要注意(yi)的是(shi),如(ru)果血清是(shi)儲存(cun)在-80℃冰箱中,正式解凍前應(ying)先轉(zhuan)移至-20℃冰箱中過(guo)渡。一(yi)(yi)次(ci)解凍后(hou),分(fen)裝(zhuang)至(zhi)無菌離心管中,盡量(liang)保(bao)證每管是一(yi)(yi)次(ci)的用(yong)量(liang),分(fen)裝(zhuang)管解凍也遵循三步法,解凍后(hou)需全部用(yong)完。

3、使用正確的儲(chu)存(cun)方式(shi):長(chang)期儲(chu)存(cun)在 2-8℃或在室溫下放置(zhi)時間過長(chang),都會引起(qi)沉淀,建議配制(zhi)好的培養(yang)基在4℃冰箱中存(cun)放不要(yao)超(chao)過7天,血清分裝好后(hou)-20℃儲(chu)存(cun)。

4、特殊的處理:γ射(she)(she)線照射(she)(she)與熱滅活也容易引起沉淀析(xi)出,因(yin)此要注意射(she)(she)線照射(she)(she)劑量以及熱滅活方法(40℃水浴加熱20分鐘即可(ke))。常規(gui)實(shi)驗中用到的(de)胎牛血(xue)清(qing),無需熱(re)滅活(huo)。

那么(me),如(ru)果(guo)想去除細胞培養過程中,血清中沉淀,又該如(ru)何(he)操(cao)作呢?

如果要除去血清中(zhong)的沉淀,可以(yi)將血清分裝至無菌(jun)離心管中(zhong),大約400g 離心(xin),留上清即可(ke)。由(you)于濾(lv)膜容易被沉淀堵塞,因此不建議(yi)用過(guo)濾(lv)的方法。

特級胎牛血清.png

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8.Ausbian血(xue)清(qing)從出(chu)廠(chang),到實驗(yan)室,全程低溫冷鏈保(bao)護(hu),確(que)保(bao)血(xue)清(qing)無反復凍融。

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